色譜峰寬的構成

       色譜分析時(shí)經(jīng)常會(huì )有先出來(lái)的峰就窄，后出來(lái)的就寬的情況。色譜峰寬是由很多因素構成的，每個(gè)因素影響程度不同，造成的結果也不同，誰(shuí)的影響力大，就主要顯示誰(shuí)的作用結果。那么色譜峰寬，到底由哪幾部分構成？

    色譜峰寬由兩部分構成： 一、對稱(chēng)峰寬。二、拖尾峰寬。所謂對稱(chēng)峰寬，就是指這種峰寬不會(huì )造成峰型不對稱(chēng)，不會(huì )出現拖尾前伸。而拖尾峰寬，就是指這個(gè)峰寬構成，會(huì )導致峰形狀變的不對稱(chēng)。我們首先要研究的是對稱(chēng)峰寬，這個(gè)導致了峰寬的主要構成。

一、對稱(chēng)峰寬。

對稱(chēng)峰寬主要包括兩部分：1、塔板理論正常展寬。2、正常進(jìn)樣峰展寬。

1、塔板理論正常展寬

    根據塔板理論，進(jìn)樣時(shí)處于0號塔板的組分，離開(kāi)色譜柱時(shí)已經(jīng)占據了很多塊塔板，導致峰寬加大，并形成正態(tài)分布的峰型。

2、正常的進(jìn)樣展寬

    根據塔板理論，樣品進(jìn)樣時(shí)都停留在0號塔板上，但這是不可能的。因為一個(gè)塔板的體積是如此的小，以至于根本放不下襯管里面哪怕是經(jīng)過(guò)分流之后的樣品。比如你的襯管有0.5ml，分流比50倍，那么進(jìn)入色譜柱的體積大約有10立方毫米。但你的毛細管柱內徑就算是0.53mm的，可是這是直徑啊，算下來(lái)，這些樣品都進(jìn)去，也要占據大約50mm長(cháng)的柱子。也就是說(shuō)，0號塔板放不下，要放到。。。。算你的柱子是50m，那么就是柱效的千分之一了，毛細管柱，算你10萬(wàn)塊板，那么也是100塊塔板了。

   那么說(shuō)，進(jìn)樣寬度就是100塊塔板了？錯。進(jìn)樣寬度沒(méi)有這么大，只有這個(gè)數值除以分配比k之后的塔板數。為什么要除以分配比？因為色譜柱固定相可以溶解很多樣品中待測組分，所以待測組分在這100塊板上濃度不同，只有前面1/k的塔板上濃度比較高。

1、為什么毛細管柱，所有色譜峰基本一般寬？

答：因為毛細管柱內徑小，樣品進(jìn)樣正常展寬很大，而且因為柱效率（理論塔板數）高，所以塔板理論展寬與柱效率的平方根成反比，這個(gè)很小，所以峰寬主要由進(jìn)樣展寬構成，而組分的進(jìn)樣展寬在色譜柱內前進(jìn)時(shí)保持不變，所以從柱尾流出來(lái)的時(shí)候，寬度主要由進(jìn)樣展寬決定，而所有組分的進(jìn)樣展寬基本一致，因此都是一樣寬。

 2、為什么填充柱色譜，先出峰很窄，后出峰很寬？

答：因為填充柱的內徑大，樣品進(jìn)樣正常展寬很小，所以峰寬主要是踏板理論展寬構成，而根據踏板理論，峰寬與保留時(shí)間成正比，所以后出的峰比較寬。

3、為什么會(huì )有溶劑聚焦現象？

答：因為溶劑聚焦是柱箱初始溫度比溶劑沸點(diǎn)低，導致溶劑在柱頭冷凝成液體，相當于增加了一層溶解度很大的固定液，導致分配比k增加很多倍，這樣進(jìn)樣寬度就減小很多倍，所以色譜峰就窄了。

4、為什么有的難分離組分用薄膜柱子或者固定液涂澤量少的柱子來(lái)分析分離度大，而更多的組分用厚膜或者固定液涂澤量大的分離度高？

答：分離度等于保留時(shí)間之差除以峰寬之和的一半。根據速率理論，薄膜的柱子傳質(zhì)阻力小，所以柱效率高，分離度高。但根據進(jìn)樣寬度，厚膜柱子分配比k大，所以進(jìn)樣展寬小，色譜峰寬小，因此分離度高。

     一般來(lái)說(shuō)，高含量組分用厚膜柱子好，可以減少進(jìn)樣寬度，增加分離度；低含量組分用厚膜柱子好，因為厚膜柱子允許更大的進(jìn)樣量，檢出限高。??？那么薄膜柱子就沒(méi)存在的必要了？錯。薄膜柱子柱流失小的多，而且對于含量不大不小的樣品，也有更好的分離度。

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