液相色譜柱中使用zui多的就是C18色譜柱了,下面整理的有關(guān)C18液相色譜柱的基本維護對于剛接觸色譜柱的朋友也許有點(diǎn)小幫助。
1.色譜柱的流向不能改變
在我們常規思維中,色譜柱上標示的流向是不可改變的,每次使用都要遵循??墒?,大家有沒(méi)有想過(guò)這個(gè)方向的作用是什么呢?為什么要標示一個(gè)使用方向呢?其實(shí)色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的,標示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動(dòng)相從哪個(gè)方向流入色譜柱,那么這個(gè)流入段就是zui先污染端。這樣就為我們日后維護或再生色譜柱做了準備,而我們需要遵循這個(gè)規定應該在色譜柱開(kāi)始做樣后。
我曾將已經(jīng)污染過(guò)的色譜柱反方向來(lái)使用,如果保留時(shí)間不是很長(cháng),而色譜柱足夠長(cháng),還是能使用一段時(shí)間的。
2.看清色譜柱說(shuō)明書(shū)后再上機使用
色譜柱內部保存著(zhù)什么溶劑一定要看清楚,因此色譜柱的說(shuō)明書(shū)一定要看清楚,當然也包括說(shuō)明書(shū)上建議的維護保養規定,對我們都非常的有用。對于反相柱來(lái)說(shuō),溶劑基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了,因為正相柱除了可以適用正相系統,也可以適用反相系統,因此一定要看清楚,對于你的方法來(lái)說(shuō)是否需要置換色譜柱內部保存溶劑。
3.用純水沖洗色譜柱才能把緩沖液沖洗干凈
使用強溶劑沖洗色譜柱對內部填料的損傷是zui大的,尤其是純水,除非你的色譜柱是耐水的。沖洗色譜柱的方法是用流動(dòng)相比例的水系和有機系來(lái)沖洗。如果你認為流動(dòng)相比例無(wú)法把色譜柱沖洗干凈或者此比例中有機系占有比例過(guò)大,你可以使用內含10%左右的純水來(lái)沖洗。
4.保存在乙腈或甲醇中的新色譜柱可以直接使用
理論上液相色譜柱不同于氣相色譜柱需要活化,但是由于液相色譜柱內部保存的有機系具有揮發(fā)性,因此在使用前還是應該用小流速的和色譜柱內部相同的溶劑沖洗一定的時(shí)間??梢允?.5ml/min,120min,但咨詢(xún)廠(chǎng)家,根據色譜柱參數設定。
5.色譜柱應該保存在純乙腈或甲醇中
根據第4條,色譜柱內部保存液具有揮發(fā)性,因此為了減少其揮發(fā)速度,可以添加5%-10%的水,這樣的話(huà)可以在一定程度上減少一些有機系的揮發(fā)。如果再增加一個(gè)保險,我們可以在堵緊堵頭后,再用封口膜封起來(lái)。同樣道理,色譜柱一段時(shí)間不用后,也應該按照第4條,進(jìn)行小流速的沖洗色譜柱。
6.色譜柱污染后把篩板卸下來(lái)超聲清洗
對于色譜柱的污染,*的就是篩板,因此我們zui常用的做法就是把柱頭卸下來(lái),把篩板拿去超聲清洗。但是我們在拆卸過(guò)程中對色譜柱前端填料的損害遠遠大于污染照成的傷害,因為我們不是專(zhuān)業(yè)的。因此建議這一步能不做就不做。
7.自己填裝色譜柱
和第6條相同,這一步做法幾乎可以把此色譜柱判死刑了,我們的填裝工具有什么呢?就是手工的,其填裝壓力遠遠小于工廠(chǎng)內原始的填裝壓力。那么我們填裝的結果會(huì )是個(gè)什么樣也就很明顯了。
8.用異丙醇沖洗再生后,柱子效果更差了
這種情況我自己就遇到過(guò),還好那根柱子本來(lái)就打算報廢了,因此也沒(méi)有照成多少損失。但是這是什么原因呢?其實(shí)很簡(jiǎn)單,就是在我反向沖洗前沒(méi)有把管路中的污染物沖洗干凈就直接接了柱子。所以說(shuō),方法是沒(méi)有錯的,色譜柱受污染時(shí),我們應該先想到儀器也污染了!
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