淺談提高液相色譜柱柱效的幾種方法

1、提高液相色譜柱柱效的方法

（1）降低移動(dòng)相的流速,但會(huì )使分析時(shí)間延長(cháng)。

（2）減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。

（3）減小固定相的顆粒度,但不能過(guò)分,過(guò)分后色譜柱的滲透率也會(huì )減小。

（4）選用低粘度的移動(dòng)相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。

（5）適當提高柱溫,可降低移動(dòng)相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。

（6）盡量減小停滯移動(dòng)相的體積,但卻加快了移動(dòng)相的流速。

    從以上介紹可看出,在色譜分析過(guò)程中,各種因素是互相聯(lián)系和制約的。只有通過(guò)對柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實(shí)踐,才能找到*的工作條件。

2、對柱效值進(jìn)行跟蹤測算應注意的問(wèn)題

   柱效值并不足以預測在所有條件下的柱性能，對大多數色譜工作者來(lái)說(shuō),柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。

    不管用什么特定的測試方法,都會(huì )有幾個(gè)參數影響柱效的測定。這些參數包括:洗脫液的成分和粘度及其線(xiàn)流速,測定塔板數所用的溶質(zhì),溫度,柱長(cháng),填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著(zhù)極大的作用。

3、幾種測量和計算柱效值的方法

   因為色譜峰是假定樣品濃度在移動(dòng)相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線(xiàn)來(lái)計算理論塔板數。因此計算柱效（以理論塔板數n為單位）的公式習慣上定義為:n=t²R/σ²=a（tR²/ωb²）

    式中tR為色譜峰的保留時(shí)間;σ2是以時(shí)間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰高（從測峰寬的基線(xiàn)量起）有關(guān)的常數,ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點(diǎn)與色譜峰兩側拐點(diǎn)處做切線(xiàn)與峰底基線(xiàn)相交兩點(diǎn)間的距離。